如何才能做出高品質免疫組化圖片
更新時間:2023-07-07 點擊次數:434次如何才能做出高品質免疫組化圖片
免疫組化:根據抗原抗體反應和化學顯色原理,組織切片中的抗原先和一抗結合,再利用一抗與標記、熒光素等的二抗進行反應,前者再用標記辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗(如鏈霉親和素等)結合,后通過光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物,從而進行對抗原進行定位。
免疫組化(IHC)實驗代測
結果展示:
1.預實驗結果 確認抗體稀釋倍數和樣本情況
2.正式結果圖片:提供染好的片子,結果以掃片形式提供,老師可查看任意視野,倍數也可任意調節。
3.實驗結果分析(片子分析需另外收費,可選做)
實驗要求:
客戶需自備一抗,本公司可代為購買一抗。
客戶需提供詳細的樣品資料(如組織來源等),以便于實驗的順利進行。
技術部將在收到標本后15-20個工作日之內將作好的片子交于客戶。
送樣運輸要求:
注意事項:
1)石蠟切片制片,組織取樣后應立即放入固定液中,避免凍存;
2)冰凍切片制片應取用新鮮組織,以免抗原丟失;
我們承諾免免疫組化相關技術人員操作規范,并設立完備的陰性對照,為您提供高質量的免疫組化檢測結果。
免疫組化:服務內容和流程:
1.組織標本固定好后,我們開始組織脫水、石蠟包埋、石蠟切片;
2.常規染色(HE染色)或特殊病理染色(masson、PAS染色等);
3.免疫組化檢測;
4.圖片拍照、圖片分析、數據統計。且拍片位置準確、效果好,免去您自己花大量時間坐在顯微鏡前拍片的煩惱。
免疫組化實驗服務:
您需提供:固定好的樣本、石蠟塊均可,一抗;
我們提供:免疫組化實驗報告、免疫組化結果圖片、實驗結果的分析和統計(陽性率分析);
實驗周期:2周。
一抗的選點和技巧
(1)單克隆和多克隆抗體的選擇。單克隆和多克隆抗體的內在特征決定了它們用于IHC/ICC時的優勢和限制。單克隆抗體由單個B細胞克隆產生,代表了同質群體,能夠高親和力高特異性地與單個表位結合。這在檢測蛋白家族的某個成員時特別有用,因為蛋白家族有著高比例的氨基酸同源性。
抗體結合往往依賴于目標蛋白維持其天然的構想狀態。與其他蛋白的相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH、固定和鹽濃度都會影響抗體接近目的表位。多克隆抗體是異質的,可識別多個表位,因此它們較少受到蛋白構象變化的影響。
一般而言,多克隆抗體在一定pH和鹽濃度范圍內也比單克隆抗體更為穩定。基于這些原因,多克隆抗體更常用于IHC/ICC實驗。
(2)應用范圍的選擇。有的一抗只能用于Western Blotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;甚至表明石蠟切片或冰凍切片。
(3)種屬反應性的選擇。這一點很重要,表明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體適合檢測哪種種屬動物體內的抗原。
(4)種屬來源,一般兔來源的多是多克隆;而小鼠來源的多是單克隆,但也有另外。根據此來源來選擇相應的二抗。
(5)生產廠家的選擇。
尊敬的客戶:
本公司有放射免疫技術服務、蛋白質組學服務、免疫組化、PCR技術服務、生物信息學數據分析等,如果您想了解免疫組化的更多內容或者其他服務信息,您可以本公司的服務熱線了解更多產品的詳細信息,至善至美的服務是我們永無止境的追求,歡迎新老客戶放心選購自己心儀產品,我們將竭誠為您服務!